產(chǎn)品概述：產(chǎn)品內(nèi)容 組分
S6011S (5-20 μg)
S6011M (20-50 μg)
S6011L (50-100 μg)
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A: Dye vial
1 vial
1 vial
1 vial
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B: Super-n-stain? reaction buffer, 10 ×
1 vial of 15 μL
1 vial of 15 μL
1 vial of 30 μL
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C: Super-n-stain? antibody storage buffer
1 vial of 60 μL
1 vial of 150 μL
1 vial of 300 μL
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D: Ultrafiltration vial (MWCO=10K)
1 each
1 each
1 each
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染料信息
Super-n-stain? Antibody Labeling Kit
貨號
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Label Dye
Ex (nm)
Em (nm)
1 × (5-20 μg)
1 × (20-50 μg)
1 × (50-100 μg)
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Biotin
N/A
N/A
S601101S
S601101M
S601101L
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FITC
494
518
S601102S
S601102M
S601102L
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YF?350 SE
347
448
S601103S
S601103M
S601103L
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YF?405S SE
404
431
S601104S
S601104M
S601104L
|
LS405 SE
408
452
S601105S
S601105M
S601105L
|
YF?488(6)-2 SE
490
515
S601106S
S601106M
S601106L
|
YF?532 SE
527
558
S601107S
S601107M
S601107L
|
YF?555 SE
555
565
S601121S
S601121M
S601121L
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YF?568 SE
562
583
S601108S
S601108M
S601108L
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YF?594 SE
590
617
S601109S
S601109M
S601109L
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YF?640 SE
642
662
S601112S
S601112M
S601112L
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YF?647A SE
650
665
S601113S
S601113M
S601113L
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YF?660 SE
663
682
S601114S
S601114M
S601114L
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YF?750 SE
750
777
S601120S
S601120M
S601120L
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儲存條件
-20℃保存，有效期見外包裝。產(chǎn)品應用Super-n-stain? 抗體標記試劑盒包含您需要的利用本公司YF 染料或生物素（Biotin）迅速標記抗體的所有組分。標記過程只需將抗體和染料簡單混合于試劑盒內(nèi)提供的反應緩沖溶液中，進行短時間的孵育即可。Super-n-stain? 染料在標記結束時不再反應，因此無需進一步純化步驟。標記后，約4-6分子染料與1分子抗體共價結合。Super-n-stain?是共價標記，所以用它標記的抗體可以用于多色熒光染色，而不會發(fā)生抗體間的染料轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。Super-n-stain? 標記可以兼容NaN3、低濃度的甘油、Tris和甘氨酸。試劑盒里提供的微型超濾離心管可以在標記前快速去除不兼容的小分子抗體穩(wěn)定劑。標準Super-n-stain? 標記步驟可以用于多于IgG (μg) 4倍的BSA或明膠樣品。根據(jù)您希望標記的IgG量來選擇試劑盒大小。優(yōu)化標記步驟適用于穩(wěn)定蛋白質(zhì)過?；蚋顾腎gG樣品。在這種情況下，根據(jù)需要標記抗體樣本的蛋白質(zhì)總量（IgG + 穩(wěn)定劑，或腹水中總蛋白量）來選擇試劑盒大小。優(yōu)化步驟也可用于標記IgG量低于最低范圍的樣品，通過添加穩(wěn)定劑蛋白使總蛋白量達到試劑盒的標記范圍。優(yōu)化步驟不建議用于標記天然抗血清或雜交瘤細胞株培養(yǎng)上清，因為這些樣本的抗體含量相對于總蛋白非常低。當用熒光標記抗體直接進行免疫熒光時，您可能需要使用更高濃度的抗體來實現(xiàn)類似間接免疫熒光法檢測（一抗加標記二抗）染色的強度。在我們的內(nèi)部測試中發(fā)現(xiàn)，間接免疫熒光染色結果是直接免疫熒光染色信號的三倍左右。標記二抗仍可以連接到使用Super-n-stain? 試劑盒標記的一抗上，因此如果多個來自同一物種的抗體用于多色免疫熒光染色法，二抗無法區(qū)分同一物種來源的未標記的一抗和使用Super-n-stain? 試劑盒標記的一抗。Super-n-stain?標記抗體可以用作傳統(tǒng)間接免疫熒光法檢測后的三級染色。UElandy 還提供生物素Super-n-stain? 標記試劑盒、二次檢測使用的YF 染料標記的鏈霉親和素或YF染料標記的單克隆生物素抗體。我們還提供酶標記和熒光蛋白標記的 Super-n-stain?試劑盒，以及小配體標記試劑盒（請訪問www.uelandy.com）。更多信息，請參見常見問題。
常見問題解答：◆實驗過程中沒有純化步驟，我如何將未標記上的熒光染料除去？該問題描述了我們研發(fā)的關鍵因素，我們獨特的染料、緩沖液組分以及完善的標記策略已經(jīng)完美地解決了這個問題，具體機制涉及專利保護，不便透露。◆Super-n-stain? 試劑盒可用于多色免疫標記嗎，不同抗體間是否會發(fā)生染料轉(zhuǎn)移？Super-n-stain? 試劑盒抗體與染料是共價結合方式，不存在染料擴散和轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。詳細信息請參照上面產(chǎn)品說明部分。◆Super-n-stain? 試劑盒可用于標記抗體以外的蛋白嗎？該試劑盒是針對 IgG 抗體標記優(yōu)化設計的，不推薦用于標記其它蛋白。Super-n-stain? 標記條件可能會導致 IgM 變性。◆Super-n-stain? 試劑盒標記一抗和二抗的靈敏性是否一樣？直接免疫熒光檢測信號會弱于間接檢測，詳細信息請參照上面產(chǎn)品說明部分。◆用標記二抗的間接標記相比，直接標記復合物有哪些優(yōu)勢？直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步驟，容許來自同一物種的多個抗體同時使用進行多色檢測，可以使用來自同一物種的抗體進行動物組織染色，從而避免了二抗的交叉反應。◆Super-n-stain? 試劑盒與 Invitrogen’s Zenon 抗體標記試劑盒相比，有哪些優(yōu)勢？主要優(yōu)勢：1. YF 染料與抗體共價結合避免了多重染色時染料轉(zhuǎn)移和擴散現(xiàn)象；2. Super-n-stain? 復合物在儲液中可穩(wěn)定保存幾個月之久，而 Zenon 標記物必須在 30min 內(nèi)使用；3. Super-n-stain? 復合物體積更小些，因為染料直接與抗體結合，而 Zenon 復合物與抗體片段配合使用；4. 無需進行 YF 染料與標記蛋白的比例優(yōu)化，直接混合、染色即可；5. 無需進行后染固定；6.沒有種屬特異性◆Super-n-stain? 試劑盒與 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗體標記試劑盒相比，有哪些優(yōu)勢？
Super-n-stain? 試劑盒使用熒光更亮、光穩(wěn)定性更好的 YF 染料，試劑盒規(guī)格更靈活，可提供至單個抗體標記反應。
◆什么是 YF 染料？
YF 染料是一種水溶性較好、用于標記蛋白和核酸的小分子有機染料。我們可提供多達 20 種的此類 YF 染料。◆我應如何選擇 Super-n-stain? 試劑盒？
每種 YF 染料，我們都提供三種不同抗體標記量的試劑盒，分別是：5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。對于沒有穩(wěn)定劑的抗體標記，根據(jù)抗體規(guī)格，選擇其中一種即可，含有穩(wěn)定劑的抗體標記，請參考產(chǎn)品描述中的表 1。
◆若待標記抗體總量適用于兩種 Super-n-stain? 試劑盒，我應如何選擇？
例如：標記 50 μg 抗體，我應購買 50-100 μg 抗體標記試劑盒還是 20-50μg 的試劑盒？
遇到這種情況，兩種規(guī)格都可以得到較好的結果，使用較小規(guī)格的效果更好。
◆如何選擇染料與蛋白的比例獲得較好的標記效果？
如果待標記的抗體量在試劑盒范圍內(nèi)，無需改變?nèi)玖狭炕蚍磻獣r間，因為 Super-n-stain? 試劑盒中染料和反應緩沖液可以確保較好的標記效果。◆我可以拆分試劑盒組分，以便多次使用嗎？不行，因為 Super-n-stain? 試劑盒已經(jīng)優(yōu)化至一個標記單位，我們不建議拆分試劑盒以標記多個抗體或多次使用。◆抗體濃度是否影響標記效率？Super-n-stain? 試劑盒較好的標記抗體濃度為 0.5-1 mg/mL，您可通過濃縮或稀釋使待標記抗體達到上述濃度范圍，小于或超過該濃度范圍，會導致標記效率過低或過多。◆使用標記后的抗體進行免疫熒光染色未觀察到熒光信號?與供應商聯(lián)系，確?？贵w組分、濃度在容許范圍內(nèi)。◆使用標記后的抗體進行免疫熒光染色未觀察到熒光信號怎么辦？
與供應商聯(lián)系，確?？贵w組分、濃度在容許范圍內(nèi)。在直接標記前，應確定用于間接標記的一抗的敏感性和特異性。為了得到與間接標記相同的信號強度，直接標記時需要使用更高濃度的一抗，更多信息請參考產(chǎn)品應用部分。共價標記可能會影響某些抗體的反應活性?？梢酝ㄟ^實驗確定是否是這一因素的原因，即使用 Super-n-stain? 標記的一抗和熒光標記的二抗進行間接免疫染色，以確定 Super-n-stain? 標記后的一抗是否仍具有反應活性。如果有兼容 YF 染料的激發(fā)/發(fā)射波長的熒光讀膠儀或掃描儀，可以通過 SDS-PAGE 電泳確定抗體是否標記上染料，取 0.1-0.5 μg 標記抗體進行變性 SDS-PAGE電泳，然后進行凝膠拍照，你應該可以觀察到 IgG 的 55 kDa 的重鏈和 25 kDa 的輕鏈對應的兩條熒光條帶。
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