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螞蟻淘/JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒/100T/J6004L
  • 螞蟻淘/JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒/100T/J6004L

螞蟻淘/JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒/100T/J6004L

價(jià)格: ￥1100.00 市場(chǎng)價(jià): 1833.33
貨號(hào): J6004L
品牌: ebiomall
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    • 產(chǎn)品概述：產(chǎn)品內(nèi)容組分J6004S (20T)J6004L (100T)A: JC-1, 100× in DMSO100 μL500 μLB: 10× Assay Buffer2 × 1 mL10 mLC: CCCP, 50 mM10 μL50 μL儲(chǔ)存條件 4℃避光冷藏，并盡量避免反復(fù)凍融。有效期見外包裝。 光譜特性 Ex/Em：510/527 nm （單體物，綠色）Ex/Em：585/590 nm （聚合物，紅色） 產(chǎn)品介紹 線粒體膜電位降低是細(xì)胞早期凋亡的一個(gè)標(biāo)志，它發(fā)生在細(xì)胞膜上的磷酯酰絲氨酸外翻與 Caspase 水解酶激活之前。當(dāng)線粒體膜通透性發(fā)生改變時(shí)，膜電位會(huì)降低。這種膜電位的改變是由于 Bax 二聚體的形成和 Bid, Bak, Bad 的激活，從而誘導(dǎo)線粒體膜形成孔隙造成的。當(dāng)這些促凋亡蛋白被激活時(shí)，線粒體同時(shí)也將細(xì)胞色素 C 釋放到細(xì)胞質(zhì)中。 JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△ Ψm 的理想熒光探針，它可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí)，JC-1 聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，產(chǎn)生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí) JC-1 為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。通過 JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到膜電位的下降，同時(shí)也可以用 JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。 JC-1 單體的最大激發(fā)波長(zhǎng)為 510 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm；JC-1 聚合物的最大激發(fā)波長(zhǎng)為 585 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為 590 nm。這款試劑盒操作簡(jiǎn)單快速，可以通過流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)。
      說明書：UE-J6004S/J6004L
      MSDS：MSDS J6004 JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit
      常見問題解答：◆在測(cè)線粒體膜電位時(shí)，未處理的細(xì)胞也會(huì)發(fā)出熒光，而且在試驗(yàn)樣品中為什么沒有看到顯著差異？

      無論您使用哪種染料，四甲基羅丹明甲酯（TMRM）還是MitoTracker Red FM，未處理的細(xì)胞都會(huì)發(fā)出熒光。只要細(xì)胞線粒體膜電位降低就會(huì)導(dǎo)致熒光信號(hào)降低，最重要的是變化的程度。當(dāng)線粒體膜電位發(fā)生改變時(shí)，JC-1染料不僅強(qiáng)度改變，還有激發(fā)和發(fā)射比例光譜的改變。設(shè)置未處理的對(duì)照和用線粒體膜電位去穩(wěn)定劑（如CCCP或FCCP）處理的陽性對(duì)照是非常重要的。這些染料僅用于活細(xì)胞，在固定處理的細(xì)胞中無法保留相同程度的信號(hào)。◆用PFA固定是否可行（現(xiàn)場(chǎng)成像后，用于儲(chǔ)存）？或者這會(huì)干擾染料信號(hào)嗎？如果您想保持JC-1染料和固定后檢測(cè)到的線粒體膜電位之間的關(guān)系，這是不可能的，這是因?yàn)镴C-1依賴于線粒體膜電位，而線粒體膜電位將被固定所消除。◆請(qǐng)問做JC-1培養(yǎng)板該如何選擇？比如用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度的話是否一定需要在避光培養(yǎng)板中做？普通的透明板可以嗎？如果用熒光顯微鏡觀察拍照的話又應(yīng)該用什么板呢？熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)的話要選用黑色的酶標(biāo)板，熒光顯微鏡拍照的話可以用透明的板子◆請(qǐng)問，對(duì)于從動(dòng)物組織中用線粒體提取試劑盒提取出來的線粒體，用CCCP設(shè)置陽性對(duì)照組時(shí)，應(yīng)該用什么濃度處理多長(zhǎng)時(shí)間，不同組織中提純出來的線粒體，處理方式是否不同？純化的線粒體不適合用于CCCP做陽性對(duì)照◆可以用來組織切片染色嗎，如果可以需要注意什么呢？適用于組織的流式檢測(cè)嗎?需要新鮮組織，先提取純化線粒體再檢測(cè),可能不太適合做流式◆請(qǐng)問CCCP對(duì)細(xì)胞膜電位的抑制作用可以有多長(zhǎng)，我想測(cè)試長(zhǎng)時(shí)間的48h？之后再染JC-1，有什么建議嗎？對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10μM CCCP處理20分鐘后線粒體的膜電位會(huì)完全喪失，JC-1染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料確定◆你好，請(qǐng)問染完色后，用抗淬滅劑封片后免疫熒光顯微鏡觀察，鏡下觀察細(xì)胞會(huì)移動(dòng)，拍出來的照片是模糊的，請(qǐng)問出現(xiàn)這種情況一般考慮什么問題？怎么解決呢？可能是細(xì)胞沒固定的原因，一般可以在孔板里染色后直接用倒置顯微鏡在孔板里觀察，不用封片◆請(qǐng)問用純化的線粒體比直接用細(xì)胞測(cè)流式有什么優(yōu)勢(shì)嗎？是孵育的時(shí)間比較短嗎？直接用細(xì)胞做的，趨勢(shì)不明顯，如果提取線粒體后去測(cè)會(huì)不會(huì)得到更明顯的結(jié)果？提取的純化線粒體是細(xì)胞器一般建議用熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)相應(yīng)的紅綠熒光值，純化的線粒體染色更好染一些，相對(duì)于細(xì)胞來說可能會(huì)更好檢測(cè)一些

      使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn)：參考文獻(xiàn)1.Mitochondrial membrane potential and nuclear changes in apoptosis caused by serum and nerve growth factor withdrawal: time course and modification by (-)-deprenyl應(yīng)用方向：熒光相對(duì)比率2.Hsp60 regulation of tumor cell apoptosis應(yīng)用方向：細(xì)胞流式3.Quantum dot-induced cell death involves Fas upregulation and lipid peroxidation in human neuroblastoma cells應(yīng)用方向：細(xì)胞成像
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