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螞蟻淘/人白細胞介素1β ELISA試劑盒（Human IL-1β ELISA KIT）/48T/H6129M
  • 螞蟻淘/人白細胞介素1β ELISA試劑盒（Human IL-1β ELISA KIT）/48T/H6129M

螞蟻淘/人白細胞介素1β ELISA試劑盒（Human IL-1β ELISA KIT）/48T/H6129M

價格: ￥1587.00 市場價: 2645.00
貨號: H6129M
品牌: ebiomall
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  • 使用說明
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    • 產品概述：儲存條件4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標準品

      500 pg

      500 pg

      2×500 pg

      按說明書進行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標準稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體（100×）

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      （現配現用）

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結合物（避光100×）

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      （現配現用）

      F.酶結合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液（20×）

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑（避光）

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。

      產品介紹Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白細胞介素 1β ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-1β濃度。IL-1 分為 IL-1α、IL-1β兩種，完整的人 IL-1α和 IL-1β 基因組分別為 10.5 kb 和 7.8 kb。人和小鼠 IL-1 基因定位于 2 號染色體，均含 7 個外顯子。IL-1 前體(ProIL-1)為 31 kDa，通過蛋白水解酶裂解形成成熟的 IL-1 分子。IL-1 在不同種屬中有較高同源性。在氨基酸水平上，IL-1α和 IL-1β在不同種屬同源性分別為 60％-70％和 75％-78％；但在同一種屬中 IL-1α與 IL-1β同源性只有 25％。人 IL-1α和 IL-1β分別由 159 和 153 個氨基酸殘基組成，分子量約 17 kDa, 等電點分別為 5 和 7，同源性為 28%。IL-1 主要是通過與其受體結合形成 IL-1 受體 (IL-1R)復合物發(fā)揮生物學作用。T 細胞、成纖維細胞表面 IL-1R 為 80 kDa，而B 細胞則為68 kDa，分別稱為IL-1RI (CDw 121 a)和IL-1RⅡ(CDw 121 b)。IL-1受體復合物至少由IL-1α或IL-1β，Ⅰ型IL-1R (IL-1 RⅠ)，IL-1R 輔助蛋白 (IL-1 RAcP)三部分組成。這一復合物介導了 IL-1 的信號轉導。IL-1α和 IL-1β是 IL-1R 激動性配基。IL-1 RAcP 是分子量約為 66 kDa 的多肽。細胞表面單獨存在的 IL-1RⅠ與配體結合后仍然是不活躍的，只有 IL-1RAcP 結合上去后，才能從不活躍狀態(tài)轉變成有激活功能的 IL-1 受體復合物。IL-1 與 IL-1RtⅡ結合后易發(fā)生降解，因此被認為是下調受體。IL-1β主要由血液中的單核細胞和巨噬細胞產生, 星形細胞，少突神經膠質細胞，腎上腺皮質細胞，NK 細胞，內皮細胞，角質形成細胞，巨核細胞，血小板，神經元，中性粒細胞，成骨細胞，許旺細胞，滋養(yǎng)層細胞，T 細胞和成纖維細胞也可產生 IL-1β 。IL-1 具有廣泛的免疫調節(jié)作用，并有致熱和介導炎癥的作用。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中人 IL-1β濃度。在人 IL-1β單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-1β會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人 IL-1β抗體，抗人 IL-1β抗體與結合在單抗上的人 IL-1β結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-1β，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，人 IL-1β 濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 IL-1β濃度。
      說明書：UE-H6129S/H6129M/H6129L
      常見問題解答：◆背景信號強是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數。2.鏈親和素-HRP結合物過量。檢查偶聯物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時間。4.孵育時間過長。縮短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

      ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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